DNA指纹技术

DNA（脱氧核糖核酸）是由核苷酸长链构成。核苷酸是由磷酸、戊糖核碱基组成。碱基有线嘌呤，鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶4种，在每个核苷酸中只有1种碱基。DNA分子是由2条逆平行的多核苷酸长链围绕着一个中心轴盘旋转形成螺旋状结构，2 条多核苷酸链上的碱基严格按照互补（C—G、A—T）规律结合成对，结合后的2个碱基成碱基对。

在DNA 分子中碱基的排列顺序决定了某段DNA特性，代表了某种遗传信息，DNA大分子的一个片断就是控制生物遗传的基因。在人的1～10万个遗传基因中约三分之二的基因是人与人相同的，其余三分之一存在着变异性，近年来进行的人类的DNA基因库研究中发现基因组DNA中含有高变区，它是一系列的可变数目串连重复序列具有高度多态性。Jeffreys等人又发现不同高变区的重复单位内有一段序列是近似的，被称为核心序列，以此做为探针对DNA分子进行限制性片断长度多态性分析。可以检测出许多高变区，产生相应的谱带，所得到的图谱具有高度个体特异性，如同人类指纹一样的高度专一，所以被称为DNA指纹图。

法医学应用的DNA 分析技术主要是DNA分子杂交技术和DNA聚合酶链式反应、而分子杂交技术包括萨森印迹杂交核斑点杂交以及凝胶原位杂交。分子杂交是指不同来源的核酸单链按碱基互补原则，通过碱基配对，以非共价键联接形成杂合分子双链。法医学检测生物检材中的DNA是将待测的DNA分子切断，得到长度不同的DNA片断、将其双链变性成为单链，使该单链DNA与标记的探针杂交、形成杂合DNA双链、通过放射自显影或者现色反映显示出待测DNA分子中不同的长度片断。

萨森印迹杂交技术

萨森印迹杂交主要技术程序

1  提取DNA：人类DNA主要以染色体形式存在于细胞核内，称核内DNA或者基因组DNA有少量存在于线粒体中，称线粒体DNA。反射含有人体有核细胞的检材，如人体器官组织、精斑、唾液斑、阴道分泌物等均可以做为提取DNA的检材。

2  DNA的限制性内切酶消化：一种限切酶只能对DNA 分子内一定碱基序列中的一定位置发生作用，使它裂开。成为长度不等的若干片断。选择的限切酶要与使用的DNA探针配合得当，以便能有效地检出限制性片断长度多态性。

3  DNA片断电泳：被酶解后的DNA即按片断长度从大到小彼此分离。DNA片断长度与在电场中迁移速度成反比，较长片断比较短片断一定缓慢。最后形成由大到小排列的一些列等为基因条带。

4  凝胶上DNA的碱变性：电泳后凝胶上的DNA片断经过碱处理使DNA双链解开，成为单链，准备与DNA探针杂交。再将凝较中和至中性。

5  萨森印迹转移：将凝胶板上被分离的DNA片断转移到硝酸纤维薄膜上或者尼龙膜上。